Электронный фонд правовой
и нормативно-технической документации
РД 52.24.784-2013 Массовая концентрация хлорофилла "а". Методика измерений спектрофотометрическим методом с экстракцией этанолом
РД 52.24.784-2013
РУКОВОДЯЩИЙ ДОКУМЕНТ
МАССОВАЯ КОНЦЕНТРАЦИЯ ХЛОРОФИЛЛА a*
________________
* В бумажном оригинале буква "a" в заголовке выделена курсивом. - Примечание изготовителя базы данных.
Методика измерений спектрофотометрическим методом с экстракцией этанолом
Дата введения 2013-12-01
1 РАЗРАБОТАН Федеральным государственным бюджетным учреждением "Гидрохимический институт" (ФГБУ "ГХИ")
2 РАЗРАБОТЧИКИ Е.Н.Бакаева, д-р биол. наук, Н.А.Игнатова, канд. биол. наук, Г.Е.Ковалева, Г.Г.Черникова
3 СОГЛАСОВАН с ФГБУ "НПО "Тайфун" 31.05.2013 и УМЗА Росгидромета 12.07.2013
4 УТВЕРЖДЕН Заместителем Руководителя Росгидромета 15.07.2013
5 АТТЕСТОВАН ФГБУ "ГХИ", свидетельство об аттестации методики измерений N 784.01.00175-2012 от 07.07.2012
6 ЗАРЕГИСТРИРОВАН ЦМТР ФГБУ "НПО "Тайфун" за номером РД 52.24.784-2013 от 02.08.2013
7 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ
Введение
При экологическом мониторинге пресноводных водоемов большое внимание уделяется обилию фитопланктона - основного продуцента первичного органического вещества. При развитии водорослей до степени "цветения" воды оценка обилия фитопланктона становится особенно актуальной. Однако исследования структуры фитопланктона сопряжены с трудностями количественного и качественного учета водорослей, требующего больших затрат времени и хороших знаний таксономии. Применение косвенных методов оценки развития фитопланктона, в частности спектрофотометрического определения пигментов в сестоне, получило широкое распространение с середины прошлого столетия. Исследователей привлекают доступность и быстрота определения пигментов, поэтому во многих гидробиологических работах принято выражать обилие водорослей количеством хлорофилла a. В настоящее время содержание хлорофилла а широко используется для оценки степени эвтрофикации и интенсивности самоочищения вод.
Фитопланктон играет в водных экосистемах самую важную роль - является поставщиком первичной продукции. Наличие и количество пигментов, в частности хлорофилла a, его концентрация служат показателем состояния фитопланктона и позволяют судить и о трофности водного объекта, и о его токсичности, т.е. о качестве вод. Трофность и токсичность являются слагаемыми качества воды, определяемого биологическими методами - биоиндикацией и биотестированием.
В РД 52.24.620 изложены основные принципы оценки уровня антропогенного эвтрофирования пресноводных экосистем по данным фитопланктона. Эта оценка основана на статистической обработке многолетней режимной информации по количественным показателям фитопланктонных сообществ в водоемах и водотоках России. Однако при оперативных наблюдениях, а особенно в случае чрезвычайных ситуаций на водном объекте, необходимо иметь экспрессную информацию для принятия управленческих решений. В этом случае оценку трофности и токсичности вод удобно производить по пигментному составу фитопланктона (в частности хлорофилла a), быстро отражающего реакцию фитопланктона на внешнее воздействие.
Пигменты фитопланктона можно разделить на две основные группы: хлорофиллы a, b, c и каротиноиды. Наибольший интерес представляет первая группа пигментов. Основным по количественному содержанию в клетках фитопланктона и лучшим показателем его фотосинтетической активности является хлорофилл a. Содержание хлорофилла a является одной из основных функциональных характеристик природного фитопланктона. Устойчивая взаимосвязь распределения пигмента с гидрохимическими, гидрологическими и гидробиологическими характеристиками конкретной акватории подтверждает его широкие информационные возможности. Содержание хлорофилла a в планктоне показывает хорошее соответствие с трофическим статусом водоемов. На основании ряда исследований были установлены концентрации хлорофилла a, характерные для основных трофических типов водоемов [1]: от 0,1 до 1,0 мкг/дм для олиготрофных; от 1,0 до 10 мкг/дм
для мезотрофных; свыше 10 мкг/дм
для эвтрофных водоемов.
Из имеющихся к настоящему времени методов определения растительных пигментов - спектрофотометрических, флуориметрических и хроматографических - в гидробиологической практике преимущественно используется спектрофотометрический метод с экстракцией пигментов, разработанный в своей основе Ричардсом Ф. и Томпсоном Т. [2]. Этот метод рекомендован для сети Росгидромета для определения пигментов фитопланктона [1].
Из существующей приборной базы для определения концентрации хлорофилла используют флуориметры. Однако флуориметры рекомендованы для определения хлорофилла a при низком содержании его в планктоне (менее 0,1 мкг/дм). На юге России, как правило, значения концентрации хлорофилла a на порядок выше.
Использование фотометров менее пригодно, чем спектрофотометров, из-за отсутствия светофильтра, близкого к 675 нм, соответствующего максимуму поглощения хлорофилла a в интактных клетках.
Наиболее оптимальными приборами для определения хлорофилла a являются спектрофотометры, не требующие сжигания пробы, с разрешающей способностью 1-2 нм при длине волны 664 нм с кюветами 1 и 2 см.
Разработка методики определения массовой концентрации хлорофилла a спектрофотометрическим методом с экстракцией этанолом обусловлена необходимостью получения адекватной информации о качестве вод поверхностных водных объектов и наличием ряда методических проблем. Так, известны разные методы экстракции хлорофилла a с помощью ацетона по ГОСТ 17.1.4.02 и этанола по ISO 10260:1992*. Формулы расчета массовой концентрации хлорофилла a, указанные в литературе, даже при использовании одного растворителя отличаются. Существенно отличаются абсолютные значения массовых концентраций хлорофилла a, получаемых с помощью разных растворителей. В этанольных вытяжках абсолютные цифры массовых концентраций хлорофилла a выше, поскольку происходит более полное экстрагирование пигмента. Кроме того, безопасность для оператора и окружающей среды при использовании этанольных экстрактов значительно ниже.
________________
* Доступ к международным и зарубежным документам, упомянутым в тексте, можно получить, обратившись в Службу поддержки пользователей. - Примечание изготовителя базы данных.
Использование данной методики позволяет повысить результативность исследований по наблюдению за качеством поверхностных вод суши и обеспечить экологическую безопасность исследований.
1.1 Настоящий руководящий документ устанавливает методику измерений массовой концентрации хлорофилла a спектрофотометрическим методом с экстракцией этанолом в диапазоне от 0,1 мкг/дм до максимальных значений, встречающихся в поверхностных водах суши различной трофности: от ультраолиготрофных до политрофных вод (далее - методика).
1.2 Методика предназначена для лабораторий, осуществляющих наблюдения за химико-биологическим состоянием поверхностных вод суши в рамках государственной службы наблюдений за состоянием окружающей природной среды, для подразделений соответствующих министерств, осуществляющих природоохранную деятельность, а также для проведения научно-исследовательских экотоксикологических и экологических работ.
2 Нормативные ссылки
В настоящем руководящем документе использованы ссылки на следующие нормативные документы:
ГОСТ 12.1.005-88 Система стандартов безопасности труда. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны
ГОСТ 12.1.007-76 Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности
Доступ к полной версии документа ограничен
Документ «РД 52.24.784-2013» представляет собой методическое руководство по определению массовой концентрации хлорофилла "а" в образцах с использованием спектрофотометрического метода с экстракцией этанолом. Он предназначен для применения в экологических, биологических и химических исследованиях, где необходима оценка содержания хлорофилла "а" в различных средах, таких как вода, почва и растительные материалы.
В документе регламентируются методы и процедуры, позволяющие точно измерять массовую концентрацию хлорофилла "а". Описываются этапы экстракции вещества с использованием этанола, а также спектрофотометрические параметры, включая длину волны и условия измерений. Установлены требования к качеству реагентов и оборудования, что обеспечивает достоверность получаемых результатов.
Технические детали, указанные в документе, включают описание условий испытаний, таких как температура, время экстракции и особенности подготовки образцов. Также предусмотрены классификации и диапазоны измеряемых величин, что позволяет лабораториям и исследовательским центрам точно интерпретировать результаты и сопоставлять их с установленными стандартами.
Целевая аудитория данного документа включает производителей, научные лаборатории, а также контролирующие органы, занимающиеся мониторингом качества окружающей среды. Стандарт служит важным инструментом для специалистов, работающих в области экологии, агрономии и пищевой промышленности, обеспечивая единые подходы к анализу и интерпретации данных.
Практическое значение стандарта заключается в его влиянии на безопасность и качество продукции, а также на охрану окружающей среды. Применение данного метода позволяет выявлять изменения в экосистемах, что важно для оценки состояния водоемов и сельскохозяйственных угодий. Кроме того, стандарт способствует улучшению совместимости методов анализа, что облегчает обмен данными между различными учреждениями и организациями.
В документе также могут быть указаны изменения и дополнения, касающиеся методов анализа и требований к оборудованию, что отражает современные тенденции в области экологического мониторинга. Эти обновления направлены на повышение точности и надежности измерений, что является ключевым аспектом в научных исследованиях и практической деятельности.
Описание документа носит справочный характер, достоверность этого материала не гарантируется.
Чтобы получить полный доступ к этому и другим документам, приобретайте доступ к Информационной сети «Техэксперт» - лидеру в области комплексного обеспечения предприятий нормативно-технической документацией.
доступны в системах «Техэксперт» и «Кодекс»