РД 64-085-89 Методические указания. Методические основы биотестирования и определения генетической опасности отходов, поступающих в окружающую среду

РД 64-085-89

РУКОВОДЯЩИЙ ДОКУМЕНТ ПО СТАНДАРТИЗАЦИИ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

МЕТОДИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ БИОТЕСТИРОВАНИЯ И ОПРЕДЕЛЕНИЯ ГЕНЕТИЧЕСКОЙ ОПАСНОСТИ ОТХОДОВ, ПОСТУПАЮЩИХ В ОКРУЖАЮЩУЮ СРЕДУ

Дата введения 1990-06-01

УТВЕРЖДАЮ

Заместитель Министра медицинской промышленности СССР В.А.Амбросов

"24" 04 1990 г.

Указанием Министерства медицинской промышленности СССР от 24.04.90 N 61-02-6/854 срок введения установлен с 1 июня 1990 г.

Введены впервые

Настоящие методические указания устанавливают методические основы биотестирования отходов производства и сточных вод, попадающих в окружающую среду и представляющих экологическую опасность. Многие из токсикантов, содержащиеся в сточных водах и отходах производства, обладают токсическим и мутагенным эффектом, что представляет генетическую опасность для человека. В связи с этим в методических указаниях, кроме определения безвредности отходов, представлены методические основы определения мутагенности изучаемых токсикантов.

Результаты работы по изучению токсичности и мутагенности сточных вод и отходов производства, проведенной согласно предложенным методическим указаниям, позволяют разработать рекомендации по обеспечению экологической безопасности.

Настоящие методические указания устанавливают методические основы биотестирования отходов производства и сточных вод на выпуске с целью устранения загрязнения окружающей среды экологически опасными веществами. Многие из токсикантов, содержащиеся в цеховых и общезаводских сточных водах и отходах ММП, обладают токсическим и мутагенным эффектом, что представляет генетическую опасность для человека. В связи с этим в методических указаниях кроме определения безвредности отходов представлены методические основы определения мутагенности изучаемых токсикантов.

Методические указания разработаны на основе современных отечественных и зарубежных данных, методов биотестирования, используемых в экологической токсикологии, а также на основе результатов собственных исследований по биотестированию и определению мутагенности сточных вод и отходов производства предприятий Министерства медицинской промышленности.

Результаты работы по изучению токсичности и мутагенности сточных вод на выпуске и отходов производства на различных этапах технологического процесса, проведенной согласно предложенным методическим указаниям, позволяют разработать рекомендации для предприятий ММП по необходимости захоронения, степени разбавления стоков, или вторичной утилизации отходов с целью соблюдения санитарных требований к водоотведению и обеспечения экологической безопасности.

Настоящие методические указания предназначены для научно-исследовательских и центральных заводских лабораторий предприятий медицинской промышленности, а также для органов контроля экологического состояния воды открытых водоемов и станции водоочистки предприятий и городов.

Методики биотестирования следует использовать при проведении исследовательских работ, предшествующих проектированию природоохранных объектов при возможности попадания в питьевую воду, а также при апробации новых технологий.

ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ

Усиление антропогенного воздействия на природу, в том числе на водоемы, в которые поступает большое количество различных химических соединений, изменяет среду обитания гидробионтов, ухудшает качество воды, снижает продуктивность промысловых объектов. Даже после биологических очистных сооружений сточные воды, сбрасываемые в водоемы, содержат токсиканты, которые могут нанести значительный ущерб здоровью человека.

Осуществление надежного контроля с использованием только химических методов исследования на предприятиях ММП практически невозможно, так как в большинстве случаев стоки производств и их жидкие отходы являются многокомпонентными и переменными по составу. Существующие методики выявления компонентов мало чувствительны, а для некоторых веществ отсутствуют. Кроме того, присутствие одних соединений мешает определению других, и проведение химических анализов требует значительного времени и не дает истинного представления о токсичности сточных вод в целом. Загрязняющие вещества в воде могут подвергаться трансформации, превращаясь в менее или более токсичные.

В связи с этим в нашей стране и за рубежом все большее значение приобретает применение методов биотестирования на группе гидробионтов - постоянных обитателей природных водных биоценозов.

Метод биологических тестов - эксперимент, в котором используют чистую культуру какого-либо из гидробионтов и изучают его реакцию на добавление токсиканта по изменению характерного, точно измеряемого показателя, который интегрально отражает вредное воздействие вещества. Чувствительность этих методов, по данным литературы, близка к чувствительности метода газо-жидкостной хроматографии. По разведению, при котором не проявляется токсического действия вещества на тест-объект, оказавшийся самым чувствительным, судят о степени опасности сточных вод.

Использование биотестов позволит предотвратить поступление сточных вод и отходов, содержащих токсиканты, выделить наиболее токсичные категории стоков, требующие локального обезвреживания.

В связи с тем, что методы биотестирования должны применяться для контроля токсичности различных категорий сточных вод, в качестве тест-объектов могут быть использованы водные организмы различного систематического положения, отличающиеся по уровню токсобности в зависимости от биологии организмов, их морфофункциональной организации.

В качестве тест-объектов в методических указаниях предлагаются фитогидробионты: одноклеточные зеленые водоросли Scenedesmus quadricauda, высшие растения - ряска Lemna minor, зоогидробионты: инфузории Tetrehymena pyriformis, низшие ракообразные - дафнии Daphnia magna, плоские черви - турбеллярии, планария Dugesia lugubris.

Основными критериями токсического действия на гидробионтов являются показатели выживаемости особей, темпа размножения, роста культуры, интенсивности дыхания и фотосинтеза, изменение фототаксиса хлоропластов; (в хронических опытах): выживаемость особей, плодовитость, анализ потомства, рост организмов, поведенческие реакции.

Определение генетической опасности стоков и отходов производства можно проводить с помощью микробиологического теста Эимса или на млекопитающих согласно принятым в методических рекомендациях по проверке мутагенных свойств у новых лекарственных препаратов. Фармакологический комитет, Москва - 1981 г., 55 с.

Для изучения генетической опасности отходов производства предлагается несколько тестов по анализу мутагенности на дрозофиле - Drosophila melanogaster. Эти исследования представляются необходимыми для выработки оптимальной стратегии нормирования сброса сточных вод и отходов и предотвращения попадания веществ опасных для здоровья. Анализ литературных данных и собственные исследования показывают мутагенное действие ряда промышленных и коммунальных стоков. Дрозофила в генетическом отношении прекрасно изученный объект, позволяющий учитывать любые типы генетических изменений, экономичный, простой в лабораторном содержании, имеющий высокую плодовитость, короткий жизненный цикл. Не случайно дрозофилу уже многие десятилетия используют при анализе мутагенности химических веществ и мутагенов окружающей среды. В опытах с химическими мутагенами показано, что дрозофила является чувствительной тест-системой, реагирующей на 10-10 вещества. Существенно отметить, что у дрозофилы, как и у млекопитающих, имеется система метаболической активации химических веществ, отсутствующая у микроорганизмов;